冷胁迫是干扰农园艺作物产出量的最主要区域探索之1。钙成瘾性性蛋白酶激酶（CDPKs/CPKs）可将钙（Ca²⁺）预警交换到神经元并激发对面对困境卡死的重点调试细胞因子，但其宏观调控考核机制尚不看不清楚。

2025年4月，浙江大学周艳虹教授团队在New Phytologist杂志上发表题为“CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato”的研究论文，揭示了CPK27通过磷酸化HY5促进类黄酮生物合成，从而将冷触发的Ca²⁺信号与类黄酮途径相结合，以增强番茄冷耐受性的分子机制。本文为理解冷信号转导提供了重要策略，拜谱生物为该研究提供了磷硝化作用遮盖位点测试服务。

英文版网站标题：CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato（New Phytologist IF：8.3）

2英文题头：CPK27通过磷酸化HY5促进黄酮类化合物的生物合成来增强番茄的耐寒性

消费者方：浙江大学

论述素材：番茄

拜谱作为技术性：磷过酸体现位点检查测量

探究总体目标：

一、分析结杲

1、CPK27在低温制冷的效果胁迫下表明调整，于是资料植物耐热性

以往实验是因为，CPK27在冷胁迫的条件下抒发调涨。为校验一种结杲，小编中小说家利用CPK27的两大敲除突变的系（cpk27 #2，#6）实施耐低温性公测，证明CPK27的转录关卡为不错低于照表组（图1a-b）。在CPK27抒发被调控的树木中，对耐低温性的加强效用为不错减退。进每三步的亚癌细胞系产品定位与促活实验是因为，冷胁迫可以淡化CPK27向癌细胞系核积少成多，并加强其磷过酸关卡（图1 f）。免役痕迹浅析进每三步核实冷胁迫诱惑 CPK27 在核内蛋白酶丰度增大、胞内丰度减轻，外源CaCl₂治理可部门恢愎cpk27的冷强烈表型，是因为CPK27根据Ca²⁺讯号发挥出来效用。（图1g-k）

图1 CPK27以Ca²⁺依赖于方法增加番茄耐低温性

2、CPK27进行干预黄吩噻嗪合成图片手段可以高湿板材损害

转录组测序可是凸显，CPK27的过展现更为明显调整黄吩噻嗪海洋生物生成视频对应染色体，如CHS、CHI和FLS等，同一黄吩噻嗪新陈代谢信号通路更为明显生物富集。而CPK27染色体变异体中这种染色体展现上涨，的提示CPK27实现促使黄吩噻嗪生成视频鼓励主茎调理超高温胁迫带来了的氧化的负压（图2a-e）。

图2 RNA-seq解析CPK27改善的冷初始化失败表观遗传

3、HY5是CPK27介导的抗寒网络信号信号通路中的重要性靶标

为确认 CPK27 与 HY5 的彼此之间用途，原作者前提是来了酵母菌双杂交种（Y2H）科学试验性操作，結果证明三者现实现实存在彼此之间用途（图3a）。双团伙荧光互补原理（BiFC）科学试验性操作逐步骤呈现CPK27 与 HY5 在体细胞结构内形成彼此之间用途（图 3b）。接着随后在免疫检测共沉积等技巧，挖掘HY5与CPK27在树种内现实现实存在彼此之间用途，且三者的彼此之间用途包括钙阳离子（Ca²⁺）依耐性（图 3c）。因此，在Co-IP科学试验性操作的蛋白质添加前释放冷胁迫加工处理，結果展示冷胁迫可增強HY5与CPK27的彼此之间用途（图 3d）。

图3 CPK27与HY5互作并磷硝化作用其关键的位点

4、CPK27磷硝化作用HY5改善其转录几丁质酶，有利于黄胺类遗传基因表述

免疫印迹分析结果发现，冷胁迫处理后CPK27可提高HY5蛋白的磷酸化水平，在体外直接磷酸化 HY5（图 4a-c）。通过磷过酸掩盖位点检测工具，发现HY5蛋白的S23和S57两个潜在磷酸化位点。为验证这些位点的功能，作者通过构建非磷酸化突变体，进行磷酸化水平验证，其中双突变体的磷酸化水平下降更为明显（图 4d）。这些结果表明，CPK27 介导的 HY5 磷酸化依赖于 S23 和 S57 这两个特定位点。

图4 CPK27磷酸性反应HY5并提高其固相关性

5、CPK27 在类黄酮生物技术分解成环路中用处于HY5的中上游

综合管理DNA理解和基础代谢物具体分析最终结果（图5），CPK27在冷胁迫回复环节中的功效于HY5的上中下游，采用调整 HY5 介导的类黄酮生态学合并信号通路作用绿植抗寒性。

图5 CPK27功用于HY5品牌进入校园市场

二、论文总结

由此可见所说，文中探析方案反映CPK27磷酸性反应淡化HY5核蛋白，成功激活类黄酮自动合成方法，导致抗钝化有机物积少成多，于是强化耐寒性水平。该探析方案指出了“Ca²⁺-CPK27-HY5-类黄酮”级联调节作用策略（图6），声明CPK27介导的HY5磷酸性反应是接钙走势与次生代谢转化功击的最为关键的阶段，为能够理解藤本植物磨难加载网展示了新焦距。

图6 CPK27-HY5引擎提升 树种承受冷胁迫的逻辑

三、拜谱个人总结

本研究利用转录组和磷酸化修饰位点检测等技术，揭示了CPK27通过磷酸化 HY5调控类黄酮生物合成途径，从而在寒冷环境下增强番茄耐寒性的机制，对解析植物应对寒冷的复杂分子调控网络具有重要意义。拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的血清质组学、体现血清质组学、分解代谢组学、转录组学等几组学食品技术服务，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。欢迎咨询！

考虑文献综述：Lin R, Zhang W, Tian R, et al. CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato. New Phytol. 2025;246(5):2174-2191. doi:10.1111/nph.70134